液相色譜柱在使用一段時間后，會出現(xiàn)一定的常見故障，如果不能很好的判斷并解決就會影響色譜柱的使用效果，從而影響樣品的分析結(jié)果。
 

　　液相色譜柱常見的幾種故障判斷及排除方法：
 

　　1柱壓問題柱壓問題是使用高效液相色譜過程中需要密切注意的地方，柱壓的穩(wěn)定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時間等密切相關(guān)。所謂柱壓穩(wěn)定并不是 指壓力值穩(wěn)定于一個恒定值而是指壓力波動范圍在50PSI(3.3 Bar)之間(在使用梯度洗脫時，柱壓平穩(wěn)緩慢的變化是允許的)。壓力過高、過低都屬于柱壓問題。
 

　　1.1 壓力過高 這是高效液相在使用中較常見的問題，指的是壓力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的原因。此時，我們應(yīng)該分段進(jìn)行檢查。
 

　　(1).首先斷開真空泵的入口處，此時PEEK管里充滿液體，使PEEK管低于溶劑瓶，看液體是否自由滴下，如果液體不滴或緩慢滴下，則是溶劑過濾頭堵塞。處理方法：用30%的硝酸浸泡半個小時，在用超純水沖洗干凈。如果液體自由滴下，溶劑過濾頭正常，在檢查；
 

　　(2).打開Purge閥，使流動相不經(jīng)過柱子，如果壓力沒有明顯下降，則是過濾白頭堵塞。處理方法：將過濾白頭取出，用10%的異丙醇超聲半個小時。如果壓力降至100PSI (6.7 Bar)以下，過濾白頭正常，在檢查；
 

　　(3).把色譜柱出口端取下，如果壓力不下降，則是柱子堵塞。處理方法：如果是緩沖鹽堵塞，則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強(qiáng)保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞，則要用比現(xiàn)在流動相更強(qiáng)的流動相沖至壓力正常。假如按上面的方法長時間沖洗壓力都不下降，則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過來接在儀器上，用流動相沖洗柱子。這時，如果柱壓仍不下降，只有換柱子入口篩板，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以盡量少用。
 

　　1.2壓力過低壓力過低的現(xiàn)象一般是由于系統(tǒng)泄漏，處理方法：尋找各個接口處，特別是色譜柱兩端的接口，把泄漏的地方旋緊即可。當(dāng)然還有一個原因就是泵里進(jìn)了空氣，但此時表現(xiàn)的往往是壓力不穩(wěn)，忽高忽低，更嚴(yán)重一點(diǎn)會導(dǎo)致泵無法吸上液體。處理方法：打開Purge閥，用3~5ml/min的流速沖洗，如果不行，則要用專用針筒在排空閥處借住外力將氣泡吸出。
 

　　2漂移問題 主要包括基線漂移和保留時間漂移。
 

　　2.1基線漂移 一般說來，機(jī)器剛起動時，基線容易漂移，大概要半個小時的平衡時間，如果你用了緩沖溶液或緩沖鹽，還有就是在低波長下(220nm)平衡時間相對會比較長，但如果你在實(shí)驗過程中發(fā)現(xiàn)基線漂移，則你要考慮下面的原因：
 

　　1.紫外燈能量不足。解決方法：更換新的紫外燈
 

　　2.柱溫波動。解決方法：控制好柱子和流動相的溫度，檢查是否有打開的窗戶或空調(diào)對著柱溫箱。
 

　　3.流通池被污染或有氣體。 解決方法：用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池(較好斷開柱子)。如有需要，可以用1N的硝酸(不要用鹽酸)。
 

　　4.流動相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成。解決方法：檢查流動相的組成，使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級的溶劑。
 

　　5、樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)(高K’值)以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現(xiàn)出一個逐步升高的基線。解決方法：使用保護(hù)柱，如有必要，在進(jìn)樣之間。在分析過程中，定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子。
 

　　6、檢測器沒有設(shè)定在較大吸收波長處。解決方法：將波長調(diào)整至較大吸收波長處
 

　　7、流動相的PH值沒有調(diào)節(jié)好。解決方法：加適量的酸或堿調(diào)至較佳PH值